镜下观察用细胞载片的制作方法

专利名称：镜下观察用细胞载片的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种镜下观察用细胞载片，尤其是一种可避免细胞形态变化、保证实验效果的镜下观察用细胞载片。
背景技术：
随着生命科学研究内容的不断充实丰富，利用体外细胞培养实验样本进行分析和观察的技术指标也不断增多，涵盖的领域日趋扩大，因此在医学领域，用显微镜观察细胞的表面形貌已非常普遍。为了便于保存和观察细胞，避免细胞形态变化，通常需要将细胞爬片用胶层固封在载玻片上。以往的制备方法是取若干适当大小(如10mmX20mm、厚度
0.14.^0.17mm)的玻璃盖玻片，浸酸和充分冲洗后高压消毒；将玻璃盖玻片放入培养皿/板中，将常规细胞铺于片前；当细胞在玻璃盖玻片上基本长满后，将细胞爬片取出；在41:下用PBS漂洗3次，充分去除残存的培养基和血清，细胞面朝上放入4°C冷丙酮中固定20分钟，晾干，之后将覆有细胞爬片的细胞层朝下扣合在载玻片上，再用树脂等胶层固定、密封(固封)。由于玻璃盖玻片的细胞贴附性差，为提高细胞贴附性，培养之前必须对玻璃盖玻片进行包被处理，费时费力；玻璃盖玻片经过多次脱水及干燥处理后脆性增加，易断裂，导致细胞形态的变化，尤其是可导致具有较长树突的细胞树突断裂，严重时致使贴壁细胞皱缩、塌陷；每次均需将覆有细胞层的玻璃盖玻片从细胞培养皿中取出，因玻璃盖玻片与培养皿底面的贴合力大，故取出载玻片较为艰难，容易在细胞面上产生划痕等。为此，人们以塑料玻片替代了玻璃载玻片。塑料玻片具有如下优点:可成为亲水性表面以促进细胞附着；对非氯化碳氢化合物、丙酮、以及其它电镜用试剂均不反应；成为细胞爬片后可以直接固定、进行染色反应等；可以直接用剪刀剪至所需要的形状等等。但是由于塑料玻片本身的光学特征，会出现浊度高以及双折射大等现象，浊度高会使镜下图像不清晰，而双折射越大越容易造成图像产生歪影等现象，均影响显微镜下对细胞实验结果的观察。同时塑料玻片本身不耐磨，储存过程中其外表面容易磨损，更进一步影响观察效果。

发明内容
本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种可避免细胞形态变化、保证实验效果的镜下观察用细胞载片。本发明的技术解 决方案是:一种镜下观察用细胞载片，有载玻片，在载玻片上通过胶层自下而上依次固封有塑料玻片、细胞层及玻璃盖玻片。本发明是将覆有细胞层的塑料玻片(细胞爬片)的细胞层朝上固定在载玻片上，然后再将玻璃盖玻片固定在细胞层上，既可发挥塑料玻片作为细胞培养爬片的种种优点，又可消除塑料玻片因浊度高、双折射大等对显微镜下观察细胞结果的影响，还可因玻璃盖玻片的耐磨性能避免储存过程中受到磨损而影响实验结果。


图1是本发明实施例的结构示意图。
具体实施例方式下面将结合

本发明的具体实施方式
。如图1所示:同现有技术一样有载玻片1，与现有技术所不同的是在载玻片I上通过胶层5自下而上依次固封有塑料玻片2、细胞层3及玻璃盖玻片4。具体制备方法是:同现有技术一样以塑料玻片2为细胞培养爬片，其上长满细胞后取出，按照现有技术方法制成干燥的覆有细胞层3的塑料玻片2，将细胞层3朝上的塑料玻片2置于载玻片I上，再将玻璃盖玻片4压在细胞层3上，最后用胶层
5(树脂)固定密封，即可。显微镜观察时，可通过玻璃盖玻片4直接观察细胞层3，避免塑料玻片2对观察结果的影响。
权利要求
1.一种镜下观察用细胞载片，有载玻片(I)，其特征在于:在载玻片(I)上通过胶层(5 )自下而上依次固封有塑料玻片(2 )、细胞层(3 )及玻璃盖玻片(4)。
全文摘要
本发明公开一种镜下观察用细胞载片，有载玻片(1)，其特征在于在载玻片(1)上通过胶层(5)自下而上依次固封有塑料玻片(2)、细胞层(3)及玻璃盖玻片(4)。既可发挥塑料玻片作为细胞培养爬片的种种优点，又可消除塑料玻片因浊度高、双折射大等对显微镜下观察细胞结果的影响，还可因玻璃盖玻片的耐磨性能避免储存过程中受到磨损而影响实验结果。
文档编号G02B21/34GK103105670SQ201310047188
公开日2013年5月15日 申请日期2013年2月6日 优先权日2013年2月6日
发明者李宏, 刘佳, 孙媛, 孔庆友 申请人:李宏, 刘佳, 孙媛, 孔庆友